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BSA的分類及正確選擇方式

BSA中文名稱為牛血清白蛋白，在酶切反應緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對酶起保護作用。BSA來源于牛血漿，是血清中的主要蛋白質(zhì)。BSA的選擇：1.診斷級BSA：診斷級牛血清白蛋白的粉末是專門用于減少可能會產(chǎn)生背景干擾以及細胞培養(yǎng)體系抑制等因素，不含蛋白酶、生物負載以及IgG，具有很低活性的內(nèi)毒素（低于3.0EU/mg）。可用于蛋白標準品、稀釋劑、偶聯(lián)物或者酶穩(wěn)定劑，也可以應用于高靈敏度的免疫分析實驗、細胞培養(yǎng)以及雜交實驗等。如EquiTech-Bio的BAH...

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DAB染色液的使用方法及注意事項

DAB染色液用于免疫組化染色，應用在Dako自動染色系統(tǒng)上。DAB染色液的使用方法1.DAB顯色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3，3-二氨基聯(lián)苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用2.顯色準備好含有待測蛋白的固相膜：包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過氧化酶（HRP）標記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟。3.加入適量的DAB顯色液，...

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人體中堿性磷酸酶的作用

堿性磷酸酶是成骨細胞的一種外酶，它的表達活性是成骨細胞分化的一個明顯特征。堿性磷酸酶廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎、和胎盤等祖師經(jīng)肝臟想膽外排除的一種酶。堿性磷酸酶的作用原理：堿性磷酸酶能催化除去DNA、RNA、三磷酸核糖核苷和三磷酸脫氧核糖核苷的5′磷酸基團。由于CIP處理后的DNA片段缺少連接酶所要求的5′磷酸末端，因此它們不能進行自連接(1)。這個特性可以在克隆時降低載體DNA的背景用途：切除DNA,RNA,rNTPs及dNTPs的5′末端磷酸基團；防止克隆載體的自環(huán)...

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胎牛血清使用中的常見問題

1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2、血清中包含絮狀沉...

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不同來源胎牛血清的差別

不同來源胎牛血清的差別市場上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細胞培養(yǎng)的人，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。本人根據(jù)十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗，總結(jié)如下：一、外觀拿到血清，先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度，良好的操作能降低血清...

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實驗室常用幾款胎牛血清（gibco hyclone）的比較

一、特級類胎牛血清（于干細胞的胎牛血清）1、Hyclone北美特級胎牛血清目前，性能好的血清，實驗室反饋不錯的，那就是Hyclone的特級胎牛血清，Hyclone的“頭牌”。這款血清--Hyclone特級胎牛血清(DefinedFBS)，貨號：SH30070，是世界上*經(jīng)過40納米過濾的*胎牛血清，的促細胞生長作用及產(chǎn)品穩(wěn)定性。內(nèi)毒素含量小于10EU/ml，血紅蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以廣泛用于各種細胞培養(yǎng)，包含任何干細胞系的培養(yǎng)。2、Gibco北美特級胎牛血清i...

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簡述溶菌酶的制備及應用領域

溶菌酶多以蛋清為原料，用于生化研究，臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。通常為白色粉末，溶于水，不溶于丙酮，適pH值為6.5。酸性介質(zhì)中可穩(wěn)定存在，堿性介質(zhì)中易失活。溶菌酶的制備：1.原料處理：新鮮或冰凍蛋清（或蛋殼水）70kg，用試紙測其pH值，應在8.0左右，經(jīng)解凍后通過鉛篩，除去蛋清中的臍帶、蛋殼碎片及其他雜質(zhì)。2.吸附：用冰水冷卻并攪拌蛋清，使溫度降到5℃，緩緩加入724樹脂10kg，攪拌，使樹脂*懸浮在蛋清中。保持溫度0-10℃，再繼續(xù)攪拌5h。將...

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溶菌酶的用途及優(yōu)點都有哪些

溶菌酶是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶，又叫胞壁質(zhì)酶。溶菌酶是采用生物工程技術進行克隆、提取而制取,以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽離子交換樹脂732吸附后，再用硫酸銨洗脫，經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。溶菌酶的優(yōu)點：1．溶菌酶是很穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，有較強的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的耐熱的酶；2．溶菌酶不會因為有機溶劑的處理而失活，當轉(zhuǎn)移到水溶液中時，溶菌酶的活力可全部恢復；3．溶菌酶可被冷凍或干燥處理，且活力穩(wěn)定；4．溶菌酶適宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品...

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