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高鐵血紅蛋白含量檢測(cè)試劑盒 其它
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

中文名稱
高鐵血紅蛋白含量檢測(cè)試劑盒 其它
有效期
6個(gè)月
儲(chǔ)存條件
2-8℃
單位

英文名稱
Methemoglobin (MetHb) Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC5600-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-22

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1095

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

高鐵血紅蛋白(MetHb)含量檢測(cè)試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號(hào):BC5600

規(guī)格:50T/48S

產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體50mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

液體60mL×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解,即為10mg/mL血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,2-8℃可保存4周。

2. 0.625 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)品配制:取50μL 10mg/mL血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,加入750μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.625mg/mL的血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品使用,現(xiàn)配現(xiàn)用。

產(chǎn)品說明:

高鐵血紅蛋白(Methemoglobin,MetHb)為血紅蛋白的氧化物,是血紅蛋白分子內(nèi)的亞鐵離子被氧化成三價(jià)鐵離子形成的。血紅蛋白具有攜氧能力,氧化后的高鐵血紅蛋白失去攜氧能力,測(cè)定高鐵血紅蛋白含量可以衡量血液及紅細(xì)胞代用品攜氧能力,其測(cè)定方法對(duì)臨床診斷高鐵血紅蛋白血癥和研制紅細(xì)胞代用品具有重要意義。

血紅蛋白與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白,脫氧后為脫氧血紅蛋白,分別測(cè)定氧合血紅蛋白、脫氧血紅蛋白和高鐵血紅蛋白在560nm、576nm、630nm處的吸光值,利用各組分在特定波長的消光系數(shù),可計(jì)算各組分的質(zhì)量濃度百分比,再測(cè)出樣本的總血紅蛋白含量,即可計(jì)算得到樣本的高鐵血紅蛋白含量。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、冰和蒸餾水。

操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):

1. 如果A總大于1.0,建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算公式中注意同步修改。

2. 如果A總小于0.01或接近空白管吸光值,可適當(dāng)增大樣本量,空白管和標(biāo)準(zhǔn)管也需要進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1. 將兔紅細(xì)胞,用蒸餾水稀釋100倍后測(cè)定總血紅蛋白含量,不稀釋直接測(cè)定A560、A576、A630,用1mL玻璃比色皿測(cè)得并計(jì)算ΔA=A-A空白=0.537-0.007 =0.530,ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362;A560=0.741,A576=1.218A630=0.104;計(jì)算:

(1)總血紅蛋白含量(mg/mL)= 0.625×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=91.51 mg/mL

(2)MetHb%=0.2380÷0.2380+0.6509+0.0329×100%=25.82%

(3)高鐵血紅蛋白含量(mg/mL=總血紅蛋白含量×MetHb%=23.627mg/mL

2. 將兔全血,用蒸餾水稀釋160倍后測(cè)定總血紅蛋白含量,不稀釋直接測(cè)定A560、A576、A630,用1mL玻璃比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA=A-A空白= 0.570-0.007 =0.563,ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362A560=1.111,A576=1.650,A630=0.072,計(jì)算:

(1)總血紅蛋白含量(mg/mL)= 0.625×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=155.525 mg/mL

(2)MetHb%=0.084÷0.2402+0.8292+0.0840×100%=7.283%

(3)高鐵血紅蛋白含量(mg/mL=總血紅蛋白含量×MetHb%=11.33mg/mL

3. 將小鼠全血,用蒸餾水稀釋160倍后測(cè)定總血紅蛋白含量,不稀釋直接測(cè)定A560、A576A630,用1mL玻璃比色皿測(cè)得并計(jì)算ΔA=A-A空白= 0.787-0.007=0.780ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362;A560=1.518A576=1.821,A630=0.373,計(jì)算:

(1)總血紅蛋白含量(mg/mL)= 0.625×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=215.47 mg/mL

(2)MetHb%=0.8201÷0.4564+0.5931+0.8201×100%=43.86%

(3)高鐵血紅蛋白含量(mg/mL=總血紅蛋白含量×MetHb%=95.51mg/mL

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