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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法糖原系列BC3355糖原磷酸化酶b(GPb)檢測試劑盒

糖原磷酸化酶b(GPb)檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

存條件
-20℃
有效期
6個月
單位

糖原磷酸化酶b(GPb)檢測試劑盒
英文名稱
Glycogen Phosphorylase b (Gpb) Activity Assay Kit
別名
糖原磷酸化酶b試劑盒 GPb Kit 糖原磷酸化酶b(GPb)試劑盒 糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Micropla

產(chǎn)品型號:BC3355

更新時間:2025-08-26

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1931

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產(chǎn)品介紹


糖原磷酸化酶bGPb活性檢測試劑盒說明書
                                            微量法
貨號:BC3355
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三粉劑×12-8℃保存
試劑四粉劑×1-20℃保存
試劑五粉劑×2-20℃保存
試劑六粉劑×2-20℃保存
試劑七粉劑×12-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入0.5 mL蒸餾水,充分混勻;

  2. 試劑三:臨用前加入0.5mL蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融;

  3. 試劑四:臨用前加入1.25 mL蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融;

  4. 試劑五:臨用前每支加入1 mL蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融;一支即可做100T,為延長試劑盒使用時間故多給一支。

  5. 試劑六:臨用前每支加入1 mL蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融;一支即可做100T,為延長試劑盒使用時間故多給一支。

  6. 試劑七:臨用前加入2 mL蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融;

  7. 工作液的配制:臨用前根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需用量,按照試劑一:試劑二:試劑三:試劑四 =148μL: 4μL: 4μL: 4μL(1T的量)的比例,充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明:
糖原磷酸化酶是糖原分解代謝中的關(guān)鍵酶,催化糖原的磷酸化反應(yīng)。該酶分為有活性的糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)和無活性的糖原磷酸化酶bGlycogen phosphorylase b, GPb)兩種形式。糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下進(jìn)行。未添加激活劑時,糖原磷酸化酶a催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映糖原磷酸化酶a活性。添加激活劑測定GPGPaGPb)總活性,未添加激活劑時測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映糖原磷酸化酶a活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、研缽/勻漿器、電子天平、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96UV板、冰和蒸餾水。

操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):

  1. 如果測定吸光值ΔA0.6,建議稀釋樣本后再測定,計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù);如果測定吸光值較低或接近空白OD值,建議增加樣本量后再進(jìn)行測定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 稱取0.1 g兔子肝臟組織,加入1 mL提取液,冰浴勻漿,8000 g4℃條件下離心10 min;取上清置于冰上待測。用石英比色皿按照測定步驟操作,計(jì)算ΔAGPa=A2-A1=0.3472-0.2253=0.1219,ΔAGP=A4-A3=0.4059-0.2274=0.1785,按公式計(jì)算活性:GPb(U/g 質(zhì)量)=321.54×(ΔAGP-ΔAGPa)÷W =321.54×(0.1785-0.1219)÷0.1 =181.99U/g 質(zhì)量

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