2015-518
【檢測(cè)原理】試劑盒采用免疫競(jìng)爭(zhēng)法分析原理結(jié)合膠體金標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)?!緳z測(cè)范圍】牛奶、生鮮奶等液態(tài)奶。【技術(shù)指標(biāo)】測(cè)下限:0.5μg/kg;【檢測(cè)步驟】樣品處理:取1ml樣品置于5ml離心管中,向離心管中加2ml提取劑,振搖2~3min后,用離心機(jī)以2000r/min,離心5min,取2ml上清液另一個(gè)5ml離心管中,向其中加2ml凈化劑,振搖5min,用離心機(jī)以2000r/min離心5min,吸取全部下層點(diǎn)滴板的一個(gè)孔中自然揮干(或加熱將其揮干),備用;樣品檢測(cè):向點(diǎn)滴板上...
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2015-514
細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí),內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶將分解核小體區(qū)間的雙鏈DNA,但核小體本身由于由組蛋白緊密結(jié)合而免受切割,單克隆抗體可以與核小體形成夾心結(jié)構(gòu),可通過檢測(cè)核小體判斷細(xì)胞是否經(jīng)歷凋亡事件。(一)原理細(xì)胞凋亡的發(fā)生,是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進(jìn)入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp~200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復(fù)合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應(yīng)用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu),可...
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2015-511
elisa試劑盒的選擇對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也存在著一定的影響因素。免疫檢測(cè)的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。由于該反應(yīng)過程受多種因素的影響,如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)等,因而檢測(cè)結(jié)果難以溯源,不同方法、不同試劑之間甚同一試劑不同批號(hào)間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測(cè)的水平,因此在引入新項(xiàng)目之前必須對(duì)試劑進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估。試劑的評(píng)估有以下幾個(gè)步驟:⑴確定開展該項(xiàng)目的必要性;⑵了解該項(xiàng)目現(xiàn)有的檢測(cè)方法和原理;⑶在了解試劑的組成基礎(chǔ)上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較,判斷標(biāo)準(zhǔn)參考方法或參考物...
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2015-56
用于小鼠ELISA試劑盒的酶應(yīng)符合以下要求:純度高,催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高,專一性強(qiáng),性質(zhì)穩(wěn)定,來源豐富,價(jià)格不貴,制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保留它的活性部分和催化能力。好在受檢標(biāo)本中不存在相同的酶。另外,它的相應(yīng)底物,價(jià)格低廉,有色產(chǎn)物易于測(cè)定等。1,不能用手接觸試劑,不要把鼻孔湊到容器口去聞試劑(特別是氣體)的氣味。2,不得嘗任何試劑的味道。注意節(jié)約試劑,嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)規(guī)定的用量取用試劑。如果沒有說明用量,一般應(yīng)按少量取用:液體1~2mL,固體只需要蓋滿試管底部。實(shí)驗(yàn)剩余的試劑既不...
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2015-54
試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦...
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2015-430
方法原理1.雙抗體(原)夾心法:檢測(cè)抗原(體)的常見方法,應(yīng)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測(cè)溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原,不能測(cè)小分子半抗原)。2.間接法:檢測(cè)抗體的方法,利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測(cè)已與固相抗原結(jié)合的抗體。3.競(jìng)爭(zhēng)法:檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體,以測(cè)抗原為例,使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多,與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少,顯色越淺,二者呈負(fù)相關(guān)?!虿僮髯⒁猗偈褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈?..
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2015-427
ELISA檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研中為廣泛為敏捷的技術(shù)手段。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)八大禁忌?1.從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,ELISA試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其正確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,推薦使用排槍加樣。4.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔...
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2015-423
單克隆抗體是由淋巴細(xì)胞雜交瘤產(chǎn)生的、只針對(duì)復(fù)合抗原分子上某一單個(gè)抗原決定簇的特異性抗體。淋巴細(xì)胞雜交瘤是用人工方法使骨髓瘤細(xì)胞(純系小鼠的腹水瘤型漿細(xì)胞)與已用抗原致敏并能分泌某種抗體的淋巴細(xì)胞(常用致敏動(dòng)物的脾細(xì)胞,起作用的是其中的B細(xì)胞)融合而成的。單克隆抗體問世以來,由于其的特征已迅速應(yīng)用于醫(yī)學(xué)很多領(lǐng)域。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫...
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