2016-59
磷酸緩沖液也叫磷酸鹽緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液,磷酸鹽緩沖液是由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉組成的溶液,那么磷酸緩沖液具體有哪些作用呢?磷酸緩沖液的作用有哪些?磷酸緩沖液主要用于一些化學(xué)實驗中不影響實驗反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值,以便讓實驗的化學(xué)反應(yīng)在佳條件下進(jìn)行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩沖液。磷酸緩沖液的作用不僅僅如此,僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋...
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2016-56
MTT是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值),來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于...
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2016-56
MTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide,又稱噻唑藍(lán)。用于細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定和對體外細(xì)胞的細(xì)胞毒性的測定。MTT的原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臢(Zā)(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲臢(Zā),用酶標(biāo)儀在490nm波長處(英文說明書寫的是570nm)測定其...
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2016-56
要知道MTT法檢測細(xì)胞活性步驟先要知道MTT是什么?MTTMTT是一種粉末狀化學(xué)試劑,全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,漢語化學(xué)名為3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細(xì)胞活性原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此...
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2016-54
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些?、一、DNA帶模糊、1、DNA降解:瓊脂糖凝膠電泳試驗中要避免核酸酶污染2、電泳緩沖液陳舊:電泳緩沖液多系使用后,離子強(qiáng)度降解,PH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳實驗,建議經(jīng)常更換電泳緩沖液。3、所用電泳條件不合適:電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm,溫度4、DNA上揚(yáng)量過多:應(yīng)減少凝膠中DNA上樣量。...
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2016-54
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法.其分析原理與其他支持物電泳的主要區(qū)別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),物質(zhì)分子通過時會受到阻力,大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當(dāng)大,對大多數(shù)蛋白質(zhì)來說其分子篩效應(yīng)微不足道,現(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳條件電泳緩沖液的pH在6~9之間,離子強(qiáng)度0.02~0.05為...
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2016-54
瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),物質(zhì)分子通過時會受到阻力,大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。在瓊脂糖凝膠電泳緩沖液又幾種適用于天然雙鏈DNA的電泳。瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配置常見瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配制(如圖)TBE通常作為5×或10×的貯存液配制和貯存。這種濃的貯存液pH應(yīng)為8.3左右,它在應(yīng)用前稀釋,并用同一種貯存液制備凝膠溶液和瓊脂糖凝膠電泳緩沖液。上述三種電泳緩沖液都比較好...
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2016-54
聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE(Polyacrylamide?gel?electrophoresis)聚丙烯酰氨凝膠電泳,是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的一種常用電泳技術(shù)。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成,聚合過程由自由基催化完成。聚丙烯酰胺凝膠電泳作用:用于分離蛋白質(zhì)和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠電泳原理:常用的催化聚合方法有兩種:化學(xué)聚合和光聚合。化學(xué)聚合通常是加入催化劑過硫酸銨(AP)以及加速劑四甲基乙二胺(TEMED),四甲基乙二胺催化過硫酸銨產(chǎn)生自...
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